Узнайте Секреты Воспитания Ребенка И Легко Получите Результат

имя и адрес пусто пусто

www.transfusion.ru

Пробы на индивидуальную совместимость

Пробы на индивидуальную совместимость про­водятся в процессе подготовки к гемотрансфузии. Ставят две реакции: пробу на индивидуальную со­вместимость по системе АВО и по резус-фактору. Предварительно для постановки реакций у реци­пиента из вены берут кровь, которую разделяют сгусток и сыворотку (отстаиванием или центрифу­гированием).

а) Проба на индивидуальную совместимость по системе АВО

На белую поверхность (тарелку, пластинку) на­носят крупную каплю {0,1 мл) сыворотки крови реципиента и маленькую капельку (0,01 мл) крови донора из флакона и смешивают их между собой, периодически покачивая тарелку (пластинку). Ре­акция проводится при температуре 15 - 25°С, ре­зультаты оценивают через 5 минут: отсутствие агг­лютинации эритроцитов донора свидетельствует о совместимости крови донора и реципиента по сис­теме АВО. Появление агглютинации указывает на их несовместимость — такую кровь данному боль­ному переливать нельзя.

б) Проба на индивидуальную совместимость по резус-фактору

После того как установлена совместимость кро­ви донора и реципиента по системе АВО, необходи­мо установить совместимость в отношении резус-фактора. Проба на совместимость по резус-фактору может быть проведена в одном из двух вариантов:

- проба с использованием 33% полиглюкина;

- проба с использованием 10% желатина.

В клинической практике наибольшее распрост­ранение получила проба с полиглюкином. Проба с использованием 33% полиглюкина Реакция проводится в центрифужной пробирке без подогрева в течение 5 минут. На дно пробирки вносят 2 капли сыворотки реципиента, 1 каплю до­норской крови и 1 каплю 33% раствора полиглю­кина. После этого содержимое перемешивают, наклоняя пробирку и вращая ее вокруг оси, рас­пределяя содержимое по стенкам ровным слоем.

Пробирку вращают в течение 5 минут, после чего добавляют 3-4 мл физиологического раствора и аккуратно перемешивают, 2-3 раза наклоняя про­бирку до горизонтальной плоскости (не взбалтывая!). После этого оценивают результат: наличие агглю­тинации эритроцитов свидетельствует о несовмес­тимости крови донора и реципиента по резус-фак­тору, такую кровь переливать нельзя. Равномерное окрашивание содержимого в пробирке, отсутствие реакции агглютинации указывает на совместимость крови донора и реципиента по резус-фактору.

Проба с использованием 10% желатина

На дно пробирки помещают 1 каплю эритроци­тов донора, предварительно отмытых десятикратным объемом физиологического раствора, затем добав­ляют 2 капли подогретого до разжижения 10% ра­створа желатина и 2 капли сыворотки реципиента.

Содержимое пробирки перемешивают и помеща­ют в водяную баню при температуре 46 - 48° С на 10 минут. После этого в пробирку добавляют б - 8 мл физиологического раствора, перемешивают содержи­мое, переворачивая пробирку 1-2 раза, и оценивают результат: наличие агглютинации эритроцитов сви­детельствует о несовместимости крови донора и ре­ципиента, ее переливание недопустимо.

Если содержимое пробирки остается равномерно окрашенным и в ней не наблюдается реакция агг­лютинации, кровь донора совместима с кровью реципиента по резус-фактору.

Биологическая проба

Несмотря на определение совместимости крови донора и больного по системе АВО и резус-фактору, нельзя быть уверенным в полной их совместимости.

Существует большое количество второстепенных групповых систем, которые могут стать причиной

развития осложнений. Для исключения этой возмож­ности в начале гемотрансфузии проводится еще одна проба на совместимость - биологическая проба.

Вначале струйно переливают 10-15 мл крови, после чего трансфузию прекращают (перекрывают капельницу) и в течение 3 минут наблюдают за состоянием больного. При отсутствии клиничес­ких проявлений реакции или осложнения (учаще­ние пульса, дыхания, появление одышки, затруднение дыхание, гиперемия лица и т. д.) вводят вновь 10-15 мл крови и в течение 3 минут снова наблюдают за больным. Так повторяют трижды.

Отсутствие реакций у больного после трехкратной проверки является признаком совместимости вливаемой крови и служит основанием для осуще­ствления всей гемотрансфузии.

При несовместимости крови донора и реципиен­та во время биологической пробы поведение паци­ента становится беспокойным: появляются тахикар­дия, одышка, гиперемия лица, ощущение озноба или жара, стеснение в груди, боли в животе, и очень важ­ный признак - боли в поясничной области.

При появлении этих признаков кровь считают несовместимой и гемотрансфузию не проводят.

Не нашли то, что искали? Воспользуйтесь поиском:

studopedia.ru

Пробы на совместимость крови донора и реципиента перед переливанием

Пробы на индивидуальную совместимость позволяют убедиться в том, что у реципиента нет антител, направленных против эритроцитов донора.

Проводится одна из следующих проб:

Проба на совместимость на плоскости при комнатной температуре

На планшет наносят 2-3 капли сыворотки реципиента и добавляют небольшое количество эритроцитов ( соотношение эритроцитов и сыворотки 1:10). Перемешивают, и в течение 5 минут наблюдают за ходом реакции. Затем добавляют 1-2 капли физиологического раствора для снятия неспецифической агглютинации. Если после этого на планшете агглютинация отсутствует, кровь совместима по групповым агглютиногенам.

Проба на совместимость с применением 33% полиглюкина.

В пробирку вносят 2 капли сыворотки реципиента, 1 каплю эритроцитов донора и добавляют 1 каплю 33% раствора полиглюкина. Пробирку вращают в пальцах не менее трех минут. Затем добавляют 2-3мл. физиологического раствора и 2-3 раза перевертывают пробирку, не взбалтывая. Пробирка просматривается на свет. Отсутствие агглютинации свидетельствует о совместимости крови.

Проба на совместимость с применением 10% желатина

В пробирку вносят 1 каплю эритроцитов донора, 2 капли желатина и 2 капли сыворотки реципиента. Пробирку встряхивают и помещают в водяную баню на 15 минут, или в термостат на 30 мин. Температура + 46-48 градусов. По истечении указанного времени в пробирку добавляют 5-8мл. физиологического раствора и двукратно переворачивают. Пробирку просматривают на свету. Отсутствие агглютинации говорит о совместимости крови.

Кроме указанных проб на совместимость, существуют также непрямая проба Кумбса, двухэтапная проба с антиглобулином.

Ошибки при определении группы крови, резус-принадлежности и проведении проб на индивидуальную совместимость

  1. Ошибка в расположении реагентов.

  2. Температурные условия. Температура в помещении должна быть не ниже 15 градусов ( при более низкой температуре возникает ложная агглютинация - холодовая, «монетные столбики»). Ложная агглютинация исчезает после добавления физиологического раствора.

  3. Ошибка в соотношении реагентов и эритроцитов. Агглютинация может быть не замечена.

  4. Малая продолжительность наблюдения.

  5. Наличие у больного трудноопределимых групп крови. Необходим индивидуальный подбор крови.

Биологическая проба

Перед переливанием контейнер с трансфузионной средой извлекают из холодильника и выдерживают при комнатной температуре в течение 30 мин. Допустимо согревание в водяной бане при температуре 37 градусов или в специальных аппаратах для разогревания компонентов крови.

Техника проведения биологической пробы:

Переливается 10мл. трансфузионной среды со скоростью 40-60 капель в мин. , затем переливание прекращают и в течение 3-х минут наблюдают за реципиентом ( общее состояние, пульс, дыхание, цвет кожи, артериальное давление, температура тела). Биологическая проба проводится трижды. Появление каких-либо клинических симптомов (озноб, боли в пояснице, чувство жара, головная боль, тошнота, ровота и т.д.) требует отказа от переливания данной трансфузионной среды.

studfiles.net


5 простых приемов для развития у ребенка самостоятельности.

Узнать

 


Методика выполнения движений с ребенком от специалиста высшей квалификации

Скачать бесплатно

 



Содержание, карта сайта.

Проба на совместимость


12. Пробы на совместимость при переливании компонентов крови

убедиться в пригодности для переливания трансфузионной среды: удостовериться в правильности обозначения группы крови и резус-принадлежности, идентичности группы крови донора и реципиента. Провести визуальный контроль контейнера с компонентом крови. Проверить герметичность, правильность паспортизации, наличия номера, даты заготовки, обозначения группы крови, резус- принадлежности, наименование консерванта, Ф.И.О. донора, наименование учреждения-заготовителя, наличие подписи врача. Компоненты крови не должны содержать сгустки, признаки гемолиза и бактериального загрязнения. Критерий годности: прозрачность плазмы, отсутствие в ней мути, хлопьев, нитей фибрина, гемолиза, наличие чёткой границы между глобулярной массой и плазмой.

2.показания к переливанию: острая анемия (при кровопотере, геморрагическом шоке), хроническая анемия (при гипо/аплазии кроветворения), тромбоцитопения, лейкопения, плазмопотеря.

3.противопоказания: абсолютные (отек легких), относительные (остротекущий туберкулез, амилоидоз, печеночно/почечная недостаточность, нарушение коронарного кровообращения (инфаркт миокарда), гломерулонефрит, тяжелые аллергические состояния.

После переливания наблюдают за пациентом в течение 48 часов. Первые 2 часа – постельный режим. Проверяют мочу (количество введенной/выделенной жидкости, цвет, прозрачность), температуру, АД. Через сутки делают общ анализ крови, общ анализ мочи.

Перед переливанием проводят 3 пробы на совместимость:

  1. совместимость по системе ABO. На планшетку нанести 2-3 капли плазмы донора, 1 каплю эритроцитов реципиента. Перемешать. Ждать 5 мин. Если агглютинации нет, то переливаем. Если есть – помещаем планшетку в суховоздушный шкаф на 5 мин (температура 37 градусов). Агглютинация есть – не переливаем, нет – переливаем.

  2. Совместимость по резусу. В центрифужную пробирку капают 2 капли плазмы донора, 1 калю эритроцитов реципиента, 1 каплю 33% полиглюкина. Встряхнуть, прокручивать 5 мин. Добавить 2-3 мл NaCl, 2-3 раза перемешать. Оценить результаты.

  3. Биологическая проба. Влить струйно пациенту 10-15 мл крови, наблюдать за реакцией. Если появились осложнения (учащение дыхания, сердцебиение, одышка, гиперемия лица, боль в пояснице) переливать кровь нельзя. Если этого ничего нет, проводим пробу еще 2 раза, наблюдаем за состоянием. Если без осложнений – переливает кровь.

Проба Бакстера: проводится больным в коме, псих.больным, глухонемым, находящимся под наркозом. Ввести 30-45 мл эритромассы, взять из вены 5-10 мл крови. Поместить в центрифугу, если сыворотка розовая, это гемолиз, переливать нельзя. Если сыворотка соломенная, переливаем.

13. Способы определения групповой принадлежности. Перекрестный метод определения групп крови по системе «аво», его предназначение.

Способы определения групповой принадлежности крови индивидуума основываются на трех принципах антигенной совместимости (Ландштейнер):

  1. У одного человека не может быть одноименных АГ и АТ.

  2. Если в эритроцитах имеется антиген одной изопары, то в плазме присутствует антитело другой изопары.

  3. При встрече одноименных антигенов и антител происходит реакция агглютинации эритроцитов.

Основное значение для обеспечения совместимости при переливании компонентов крови имеет выбор крови по системе «АВО». Выделяют два способа определения группы крови системы «АВО»:

  1. Прямой метод (прямая реакция): устанавливают наличие или отсутствие групповых АГ системы «АВО» при помощи известных АТ. Происходит определение группы крови при помощи стандартных изогемагглютинирующих сывороток или моноклональных антител.

  2. Перекрестный метод (перекрестная реакция): устанавливают наличие и АГ, и АТ при помощи стандартных изогемагглютинирующих сывороток или моноклональных антител, а так же при помощи стандартных эритроцитов.

Перекрестный метод - заключается в одновременном определении АГ при помощи стандартных сывороток, и АТ при помощи стандартных эритроцитов. У исследуемого берут кровь из вены. Ее либо центрифугируют, либо оставляют постоять 20-30 минут для отделения сыворотки. Пипеткой извлекают сыворотку, капают ее по 0,1 мл на стандартные эритроциты. После пипеткой набирают со дна пробирки эритроциты и помещают по маленькой капле рядом со стандартными сыворотками. Тщательно перемешивают, оставляют на 1-2 минуты в покое, затем поколачивают. На 3 минуте добавляют теплый NaCl(для исключения ложной холодовой агглютинации, когдаэритроциты могут принимать вид «монетных столбиков»). Если после этого агглютинация исчезла, то она была ложной, если осталась – то образовался комплекс антиген-антитело.

Положит. Результат: появляются агглютинаты (комочки из эритроцитов).

Отрицательный результат: в течение 5 минут жидкость остается равномерно красной.

studfiles.net

Методика проб на совместимость крови при переливании

До проведения гемотрансфузии следует установить группу крови (ГК) реципиента, донора и провести ряд проб на индивидуальную совместимость. Рассмотрим каждую из этих проб подробнее.

Определение ГК донора и реципиента

Вначале медицинский работник проводит определение ГК пациента по антигенам группы AB0. Самыми распространенными являются два метода – определение ГК при помощи стандартных изогемагглютинирующих сывороток и с использованием цоликлонов.

Методика проведения проб с использованием стандартных сывороток и планшеток

При использовании изогемагглютинирующих сывороток применяются стандартные сыворотки и специальные белые гладкие эмалированные тарелки со смачиваемой структурой, размеченные по 4 группам соответственно.

Порядок действий врача следующий:

  1. Врач указывает на тарелке ФИО пациента.
  2. Капает по 1 капле сывороток 0, А и В, причем используется 2 серии сывороток (получается 6 капель).
  3. Берет кровь у реципиента (капиллярную или венозную).
  4. Полученную каплю крови помещает в центр тарелки и смешивает отдельно с каждым образцом сыворотки (причем объем сыворотки нужно брать в 10 раз больше, чем объем капли крови).
  5. Перемешивает каждую пару сыворотка-кровь отдельной палочкой. Агглютинация начинается через 10-30 сек.
  6. В капли, где наблюдается агглютинация, добавляет по 1 капле физраствора и оценивает результаты.

Четвертая сыворотка (АВ) используется только если агглютинировали три предыдущие сыворотки для проверки результата. Отсутствие агглютинации со стандартной сывороткой означает отсутствие соответствующего агглютинина на эритроците. То есть, например, кровь группы 0(I) не будет агглютинировать ни с одной из используемых сывороток.

Цоликлоны, использующиеся при определении групп крови

Также возможны постановки проб с цоликлонами (анти-А и анти-Б). Процедура определения ГК будет похожа на описанную выше.

Отсутствие агглютинации с цоликлоном будет также означать отсутствие однобуквенного агглютинина на эритроците. Так, кровь III группы будет давать агглютинацию только с анти-В цоликлоном.

При проверке резус-фактора в медицине применяется так называемый ускоренный метод со стандартным универсальным реагентом .

Для этого в цетрифужную пробирку объемом не более 10 мл капают 1 каплю реагента (универсальной антирезусной сыворотки четвертой группы, с 33% декстраном — полимерным углеводом) и капают туда 1 каплю крови пациента. Затем круговым движением смешивают и разносят смесь по стенкам пробирки, затем ждут 3 минуты. На следующем этапе добавляют в емкость 2-3 мл физраствора и переворачивают емкость 2-3 раза, избегая взбалтывания. При наличии видимых лепестков агглютинации делают вывод о том, что резус-фактор положительный.

Кровь донора обязательно маркируется

Группа крови донора обычно определяется заранее, и на пакете с кровью должна быть нанесена соответствующая маркировка. Так, II группа обозначается синим, III – красным, а IV имеет желтую полоску.

Перед переливанием нужно визуально оценить ее качество: кровь, подходящая для переливания сверху желтоватая (слой плазмы), а внизу — темно – красная, собственно осадок из эритроцитов.

Однако, если в пакете видны сгустки, хлопья или пленки, а так же если плазма розовая (признак гемолиза), то такую кровь нельзя использовать.

Контрольное установление группы крови донора проводят после полного размораживания пакета. Каплю для анализа берут не из основного, а из маленького дополнительного отсека пакета. Методика определения аналогична таковым при определении у реципиента.

Результаты контрольного определения должны совпасть с информацией на флаконе. После успешного контрольного определения, приступают к выполнению проб на совместимость.

Пробы на индивидуальную совместимость

Пробы на индивидуальную совместимость проводятся по двум системам: по системе АВ0, а также по резус-фактору донора и рецепиента.

По системе АВ0

Центрифуга, которая используется для определения групп крови

При проведении пробы на индивидуальную совместимость по системе AB0 (также известной как холодовая проба) :

  • Берут 3-5 мл свежей крови реципиента, центрифугируют ее
  •  забирают каплю получившейся сыворотки.
  • Затем капля наносится на белую тарелку рядом с небольшой каплей крови донора, капли смешиваются
  • Спустя 5-10 секунд оценивается, изменился раствор или нет.
  • Если «слипания» красных клеток крови не произошло, то можно переходить к проведению пробы на установление индивидуальной совместимости по резус-фактору.

По резус-фактору

Известно два общепринятых способа определить совместимость по резус-фактору.

Первый подразумевает использование центрифуги. Для этого в пробирку для центрифугирования помещают 2 капли сыворотки пациента, 1 каплю крови из флакона, 1 каплю 33% декстрана и центрифугируют 5 минут. После этого к смеси добавляют 3-4 мл физраствора и оценивают результаты. При отсутствии агглютинации можно перейти к пробе на биологическую совместимость.

Второй метод (так называемая тепловая проба) заключается в следующем. В колбочку помещается 1 капля крови донора, 2 капли теплого 10% раствора желатина и пара капель сыворотки реципиента. Смесь инкубируют в течение 10 минут на водяной бане, где поддерживается температура +46-+48 градусов, а затем также вносят 5 мл физиологического изотонического раствора. Оценка результатов проводится аналогично пробе с центрифугой.

Проба на биологическую совместимость

Перед процедурой переливания крови необходимо провести биологическую пробу

Проба на биологическую совместимость, по сути — это первый этап непосредственно гемотрансфузии и проводится исключительно врачом. Врач, проводящий пробу, выполняет следующие действия:

  • подсоединяет капельную систему и вводит первые 15-20 мл донорской крови струйно;
  • останавливает трансфузию;
  • ждет 3-5 минут, наблюдая за пациентом. Насторожить должны появление тахикардии, затруднения дыхания, болей в пояснице, озноба или жара.
  • если все протекает благополучно, пробу считают положительной и выполняют дальнейшую трансфузию

Таким образом, если все пробы на совместимость прошли благополучно, можно проводить переливание крови. Правильная скорость переливания составляет 50-70 капель в минуту.

Конечно, существуют не только группы, описанные в системах AB0 и резус-фактора, так как всего на сегодняшний день описано 250 групп крови. Однако, проведение описанных выше проб на совместимость позволяет выявить несовместимость и по большинству других агглютининов и агглютиногенов, что в итоге делает гемотрансфузиологические мероприятия относительно безопасной процедурой при правильной подготовке.

Из видео вы узнаете как происходит процедура определения совместимости групп крови по резус-фактору:

Читайте также:  Схема переливания крови по группе и резус-фактору

Заметили ошибку? Выделите ее и нажмите Ctrl+Enter, чтобы сообщить нам.

organserdce.com

Пробы на совместимость при проведении гемотрансфузии

При переливании эритроцитсодержащих компонентов крови, помимо определения группы крови и резус-фактора, проводятся две пробы, позволяющие выявить у реципиента наличие полных и неполных антител к эритроцитам донора. Кроме того, в обязательном порядке проводится трехкратная биологическая проба.

При переливании плазмы и ее препаратов выполняется только трехкратная биологическая проба.

При переливании больному компонентов крови из нескольких флаконов или контейнеров, пробы на совместимость должны быть сделаны с содержимым каждого флакона или контейнера, даже если на них указано, что кровь получена от одного и того же донора.

Проба на выявление полных антител

Ранее именовалась «Проба на индивидуальную совместимость», «Холодовая проба». Позволяет выявить агглютинины к антигенам систем АВО, MNSs,Lewisи др.

Проба выполняется с сывороткой крови реципиента, которую получают путем центрифугирования или отстаивания крови. Сыворотка годна к употреблению при условии ее хранения в холодильнике при температуре +4ºС не более 2-х дней.

На белую пластинку наносят 2-3 капли сыворотки крови больного, к которой добавляют в 5 раз меньшую каплю крови или эритроцитарной массы донора (из контейнера) — соотношение крови и сыворотки получается приблизительно 1:10. Стеклянной палочкой с оплавленным концом перемешивают кровь с сывороткой, затем пластинку покачивают в течение 5 мин., наблюдая за ходом реакции. По истечении указанного времени в реагирующую смесь рекомендуется добавить 1-2 капли физиологического раствора для ликвидации «ложной агглютинации».

Отсутствие агглютинации свидетельствует о совместимости крови донора и реципиента, а появление агглютинации указывает на их несовместимость и недопустимость переливания этой крови.

Проба на выявление неполных антител

Ранее именовалась «Проба на совместимость по Rh-фактору», «Тепловая проба».

Может осуществляться несколькими способами. Наиболее чувствительной является непрямая проба Кумбса. Однако ее выполнение достаточно сложно, требует специального реактива (антирезусная сыворотка) и значительного времени (около 2 часов). Вследствие этого проба Кумбса выполняется только в условиях лаборатории по специальным показаниям, для индивидуального подбора крови «сложным» реципиентам. Несколько уступает ей в точности, но технически легче осуществима проба с 10% раствором желатина на водяной бане. Проба с 33% раствором полиглюкина технически наиболее простая и быстрая, но и наименее точная. Для нужд практического здравоохранения наиболее подходящей является проба с 10% раствором желатина на водяной бане.

Проба на совместимость по Rh-фактору с использованием 10% раствора желатины.

Суть реакции состоит в создании коллоидной среды и повышенной температуры, при которых неполные антитела адсорбируются на молекулах желатина и взаимодействуя с поверхностными антигенами эритроцитов, агглютинируют их .

Проба производится в пробирках при температуре + 46-48ºС в течение 10 - 15 мин. На дно пробирки, соответственно обозначенной, помещают 1 каплю эритроцитов донора, затем в нее добавляют 2 капли сыворотки больного и 2 капли подогретого до разжижения 10% раствора желатина. Раствор желатина перед употреблением необходимо тщательно просмотреть. При помутнении или появлении хлопьев желатина непригодна. Содержимое пробирки перемешивают путем встряхивания и помещают на водяную баню при температуре + 46-48ºС на 10 - 15 минут или в термостат при той же температуре на 30 мин. Затем в пробирку добавляют в нее 5-8 мл изотонического раствора хлорида натрия, перемешивают содержимое путем 1 - 2 кратного перевертывания пробирки и просматривают на свет невооруженным глазом или через лупу.

Наличие агглютинации в виде взвеси мелких, реже — крупных комочков на фоне просветленной или полностью обесцвеченной жидкости означает, что кровь донора несовместима с кровью больного и не может быть ему перелита.

Если содержимое пробирки остается равномерно окрашенным, слегка опалесцирует в ней не наблюдается агглютинации эритроцитов, то кровь донора совместима с кровью больного в отношении резус-фактора Rh (D).

NB! В Инструкции 2002 г. по сравнению с предшествовавшими инструктивными документами в технику постановки пробы с 10% желатином на водяной бане внесены изменения.Ранее время пребывания на водяной бане было 10 мин., в новой Инструкции – 15 мин. Введено использование термостата вместо водяной бани.

Проба на совместимость по Rh-фактору с использованием 33% раствора полиглюкина.

Суть пробы та же, что и предыдущей, но исключен температурный фактор.

Проба проводится в пробирке без подогрева в течение 5 мин. На дно пробирки, предварительно обозначенной, вносят 2 капли сыворотки больного, 1 каплю донорской крови и 1 каплю 33% раствора полиглюкина, специально выпускаемого для этой цели во флаконах по 5 мл. Содержимое пробирки перемешивают путем встряхивания, затем пробирку наклоняют до почти горизонтального уровня и медленно поворачивают таким образом, чтобы содержимое пробирки растеклось по стенкам. Эту процедуру продолжают в течение 5 мин. Затем в пробирку доливают 3-4 мл изотонического раствора хлорида натрия, перемешивают путем 2-3 кратного плавного перевертывания пробирки, закрыв ее пробкой и просматривают на свет невооруженным глазом.

При наличии в растворе агглютинатов на фоне просветленной или полностью обесцвеченной жидкости дается заключение о том, что кровь донора несовместима с кровью больного и не может быть ему перелита. Если содержимое пробирки остается равномерно окрашенным, без признаков агглютинации, то дается заключение о совместимости крови больного и донора по Rhо(D) фактору.

studfiles.net

Пробы на индивидуальную совместимость крови донора и реципиента

4. Пробы на индивидуальную совместимость крови донора и реципиента

  4.1. Двухэтапная проба в пробирках с антиглобулином                   

  4.2. Проба на совместимость на плоскости при комнатной температуре    

  4.3. Непрямая проба Кумбса                                            

  4.4. Проба на совместимость с применением 10% желатина                

  4.5. Проба на совместимость с применением 33% полиглюкина             

Проба на индивидуальную совместимость позволяет убедиться в том, что у реципиента нет антител, направленных против эритроцитов донора и таким образом предотвратить трансфузию эритроцитов, несовместимых с кровью больного.

Проба на совместимость, выполняемая на плоскости при комнатной температуре, имеет целью выявить у реципиента полные групповые агглютинины системы АВ0, MNSs, Lewis и др. Проба на совместимость с применением 10% желатина, 33% полиглюкина, непрямая проба Кумбса предназначена для выявления у реципиента неполных групповых антител. Двухэтапная проба в пробирках с антиглобулином предусматривает выявление и тех и других антител, в том числе групповых гемолизинов.

Наиболее чувствительной и рекомендуемой является двухэтапная проба в пробирках с антиглобулином, затем комбинация двух проб - пробы на плоскости при комнатной температуре и непрямой пробы Кумбса. Вместо непрямой пробы Кумбса может быть применена реакция конглютинации с 10% желатином или реакция конглютинации с 33% полиглюкином. Последняя проба уступает по чувствительности первым двум, однако занимает меньше времени.

4.1. Двухэтапная проба в пробирках с антиглобулином

Первый этап. В маркированную пробирку вносят 2 объема (200 мкл) сыворотки реципиента и 1 объем (100 мкл) 2% взвеси трижды отмытых эритроцитов донора, суспендированных в физиологической растворе или LISS (раствор низкой ионной силы). Содержимое пробирки перемешивают и центрифугируют при 2500 об/мин (около 600g) в течение 30 с. Затем оценивают наличие гемолиза в надосадочной жидкости, после чего осадок эритроцитов ресуспендируют, слегка постукивая кончиком пальца по дну пробирки, и определяют наличие агглютинации эритроцитов. При отсутствии выраженного гемолиза и/или агглютинации переходят к выполнению второго этапа пробы с использованием антиглобулиновой сыворотки.

Второй этап. Пробирку помещают в термостат при температуре 37°С на 30 мин, после чего снова оценивают наличие гемолиза и/или агглютинации эритроцитов. Затем эритроциты трижды отмывают физиологическим раствором, добавляют 2 объема (200 мкл) антиглобулиновой сыворотки для пробы Кумбса и перемешивают. Пробирки центрифугируют в течение 30 с, осадок эритроцитов ресуспензируют и оценивают наличие агглютинации.

Учет результатов проводят невооруженным глазом или через лупу. Выраженный гемолиз и/или агглютинация эритроцитов указывает на присутствие в сыворотке реципиента групповых гемолизинов и/или агглютининов, направленных против эритроцитов донора, и свидетельствует о несовместимости крови реципиента и донора. Отсутствие гемолиза и/или агглютинации эритроцитов свидетельствует о совместимости крови реципиента и донора.

4.2. Проба на совместимость на плоскости при комнатной температуре

На пластинку наносят 2 - 3 капли сыворотки реципиента и добавляют небольшое количество эритроцитов с таким расчетом, чтобы соотношение эритроцитов и сыворотки было 1:10 (для удобства рекомендуется сначала выпустить через иглу несколько капель эритроцитов из контейнера на край пластинки, затем оттуда стеклянной палочкой перенести маленькую каплю эритроцитов в сыворотку). Далее эритроциты перемешивают с сывороткой, пластинку слегка покачивают в течение 5 мин, наблюдая за ходом реакции. По истечении указанного времени в реагирующую смесь можно добавить 1 - 2 капли физиологического раствора для снятия возможной неспецифической агрегации эритроцитов.

Учет результатов. Наличие агглютинации эритроцитов означает, что кровь донора несовместима с кровью реципиента и не должна быть ему перелита. Если по истечении 5 мин агглютинация эритроцитов отсутствует, то это означает, что кровь донора совместима с кровью реципиента по групповым агглютиногенам.

4.3. Непрямая проба Кумбса

В пробирку вносят одну каплю (0,02 мл) осадка трижды отмытых эритроцитов донора, для чего выдавливают из пипетки небольшую каплю эритроцитов и касаются ею дна пробирки, и добавляют 4 капли (0,2 мл) сыворотки реципиента. Содержимое пробирок перемешивают встряхиванием, после чего их помещают на 45 мин в термостат при температуре +37°С. По истечении указанного времени эритроциты вновь трижды отмывают и готовят 5% взвесь в физиологическом растворе. Далее 1 каплю (0,05 мл) взвеси эритроцитов на фарфоровую пластинку, добавляют 1 каплю (0,05 мл) антиглобулиновой сыворотки и перемешивают стеклянной палочкой. Пластинку периодически покачивают в течение 5 мин.

Учет результатов проводят невооруженным глазом или через лупу. Агглютинация эритроцитов свидетельствует о том, что кровь реципиента и донора несовместимы, отсутствие агглютинации является показателем совместимости крови донора и реципиента.

4.4. Проба на совместимость с применением 10% желатина

В пробирку вносят 1 небольшую каплю (0,02 - 0,03) мл эритроцитов донора, для чего выдавливают из пипетки небольшую каплю эритроцитов и касаются ею дна пробирки, добавляют 2 капли (0,1 мл) желатина и 2 капли (0,1 мл) сыворотки реципиента. Содержимое пробирок перемешивают встряхиванием, после чего их помещают в водяную баню на 15 мин или термостат на 30 мин при температуре +46 - 48°С. По истечении указанного времени в пробирки добавляют 5 - 8 мл физиологического раствора и перемешивают содержимое путем 1 - 2-кратного переворачивания пробирок.

Результат учитывают, просматривая пробирки на свет невооруженным глазом или через лупу. Агглютинация эритроцитов свидетельствует о том, что кровь реципиента и донора несовместимы, отсутствие агглютинации является показателем совместимости крови донора и реципиента.

4.5. Проба на совместимость с применением 33% полиглюкина

В пробирку вносят 2 капли (0,1 мл) сыворотки реципиента 1 каплю (0,05) мл эритроцитов донора и добавляют 1 каплю (0,1 мл) 33% полиглюкина. Пробирку наклоняют до горизонтального положения, слегка потряхивая, затем медленно вращают таким образом, чтобы содержимое ее растеклось по стенкам тонким слоем. Такое растекание содержимого пробирки по стенкам делает реакцию более выраженной. Контакт эритроцитов с сывороткой больного при вращении пробирки следует продолжать не менее 3 мин. Через 3 - 5 мин в пробирку добавляют 2 - 3 мл физиологического раствора и перемешивают содержимое путем 2 - 3-х кратного перевертывания пробирки, не взбалтывая.

Результат учитывают, просматривая пробирки на свет невооруженным глазом или через лупу. Агглютинация эритроцитов свидетельствует о том, что кровь реципиента и донора несовместимы, отсутствие агглютинации является показателем совместимости крови донора и реципиента.

На главную


Смотрите также

Подпишитесь на бесплатный курс "Секреты воспитания"
и получите бесплатно
Секретную книгу.

Из данного курса Вы узнаете о тайнах народной педагогики, о секретах современных технологий воспитания и массу другой полезной информации для решения Ваших проблем.
Ваш e-mail: *
Ваше имя: *

12 простых формул для подготовки ребенка к детскому саду

Узнать

 


Адаптационные игры с песком

Узнать

 


Как быть счастливыми родителями

Узнать